微流道(microfluidics)晶片利用微小通道控制液體的流動、接觸與分離,讓樣品處理和分析整合在小型裝置中,使得原先需要較大反應容器、較多試劑與較長等待時間的實驗,可以被縮小到微米等級的通道中進行,原本很控制的細胞、液滴或流體介面,也能透過經設計被更細緻的觀察與應用,例如生物分子分析需要安排樣品注入、輸送與分離路徑;微凝膠製備則需要讓液滴尺寸與產量符合後續材料研究需求。
PDMS(polydimethylsiloxane,聚二甲基矽氧烷)是一種透明、柔軟、帶有彈性的矽氧高分子材料,常用於微流道晶片的開發。PDMS 之所以常在微流道與晶片實驗室(Lab-on-a-chip)相關研究中被採用,是因為它讓研究人員能用相對低門檻的方式,把細胞培養、藥物篩選、液滴控制、化學反應與生醫檢測縮小到一片透明晶片上。1990 年代後期,PDMS 被大量用於快速製作 微流道系統(microfluidic systems),也讓更多化學、生物、醫學與材料研究團隊有機會進入微流道領域。
Harrick Plasma 電漿清洗機常用於這些微流道裝置的表面處理與封裝製程。PDMS 原本偏疏水,透過空氣或氧氣電漿清潔並活化 PDMS 表面,形成矽羥基並提升親水性。將活化後的 PDMS 與同樣經過處理的玻璃或另一片 PDMS 貼合,可在接合界面形成 Si–O–Si 鍵,這就是常見的PDMS 微流道鍵合(PDMS Bonding)。
PDMS 微流道的研究與產業應用
完成鍵合後,讓PDMS 微流道變成可以導入液體的晶片平台。它可以接上注射幫浦、壓力控制系統、顯微觀察系統、感測器或細胞培養流程,成為不同研究應用的一部分。
在生醫研究中,PDMS 微流道可用於細胞培養(cell culture)、器官晶片(organ-on-a-chip)、藥物篩選(drug screening)、細胞遷移(cell migration)、單細胞分析(single-cell analysis)與疾病模型(disease model)。這類應用希望在更小、更可控的環境中,模擬或觀察生物系統。
在分析與檢測領域,PDMS 微流道可用於樣品前處理(sample preparation)、生物感測器(biosensor)、診斷晶片(diagnostic chip)或化學檢測(chemical detection)。透過通道設計,研究人員可以控制樣品的導入、混合、反應與偵測流程。
在材料與化學研究中,PDMS 微流道可用於液滴微流體(droplet microfluidics)、微反應器(microreactor)、粒子合成(particle synthesis)、界面研究(interface study)或表面功能化(surface functionalization)。研究人員可透過微通道,觀察並調整液滴生成、擴散、界面行為與反應條件。
生物分子分析晶片的開發
開發微流道分析晶片時,研究人員需要反覆調整流道設計,並製作晶片測試其分離效果。當時常用的玻璃與矽晶片製程較繁複,使設計修改與試作需要較多時間。哈佛大學化學與化學生物學系 Duffy、Whitesides 等人因此採用可由母模重複翻製的 PDMS,並以微型電泳晶片測試其分析能力。
晶片整合樣品注入與分離流道,利用電場控制液體輸送與分子分離。團隊以 Harrick 電漿設備處理 PDMS,使流道層與平面 PDMS 接合,形成封閉通道。處理後的流道表面也能在適當的水溶液條件下帶電,支援電場驅動的液體輸送。
研究成功分離胺基酸、蛋白質衍生物及 DNA 片段,其中胺基酸與帶負電蛋白質的分離表現,可與相近長度的傳統毛細管相比。這讓研究團隊能以較容易反覆試作的 PDMS 晶片,測試生物分子的分析方法,並進一步調整流道設計。
Duffy et al. (1998). 聚二甲基矽氧烷(PDMS)微流道系統的快速原型製作. Analytical Chemistry. DOI:10.1021/ac980656z。
微凝膠的微流道製備
微凝膠是微小的水凝膠粒子,可作為組織工程材料的組成單元。製備這些粒子時,研究人員需要控制粒徑,也需要取得足夠的數量供後續實驗使用。批次乳化製得的粒子大小較不一致,流動聚焦式微流道雖能控制粒徑,製備量卻較有限。維吉尼亞大學 Roosa、Griffin 等人因此採用平行化階梯乳化晶片,讓多條微流道同時產生液滴,再將液滴中的聚乙二醇(PEG)前驅液交聯成微凝膠。
團隊使用 Harrick Plasma 電漿設備處理 PDMS 與玻璃的接合面,將流道封裝成完整晶片。接合後,再以含氟矽烷修飾流道內壁,讓水相前驅液能在油相中形成液滴。平行流道的設計提高了製備量,也讓團隊能持續取得大小相近的微凝膠粒子。
製得的微凝膠經純化與吸水膨潤後,仍呈現集中的粒徑分布。團隊進一步以光交聯連接這些粒子,形成三維多孔支架,並透過顯微影像觀察粒子間的孔隙。這些微凝膠可作為後續細胞輸送與組織修復材料研究的開發。
資料來源與延伸閱讀
- Duffy et al. (1998). Rapid Prototyping of Microfluidic Systems in Poly(dimethylsiloxane). Analytical Chemistry. DOI:10.1021/ac980656z。
- Roosa et al. (2022). Microfluidic Synthesis of Microgel Building Blocks for Microporous Annealed Particle Scaffold. Journal of Visualized Experiments. DOI:10.3791/64119。